Receptores de células T artificial (também conhecidos como receptores quiméricos de células T, imunorreceptores quiméricos, receptores quiméricos de antígenos (CAR)) são receptores, que inserem uma especificidade arbitrária para uma célula imunológica. Tipicamente, estes receptores são usados para inserir especificidades de um anticorpo monoclonal para uma célula T, com a transferência da sua sequência de codificação facilitada por vetores retrovirais. Deste modo, um grande número de células T específicas de câncer podem ser gerados por transferência adotiva de células.A fase I de estudos clínicos desta abordagem mostram eficácia.
Estrutura edit
A forma mais comum destas moléculas são fusões de fragmentos variáveis de cadeia simples (scFv) derivados a partir de anticorpos monoclonais, fundidos a transmembrana e endodomínio CD3-zeta. Tais moléculas resultam na transmissão de um sinal de zeta em resposta ao reconhecimento pelo scFv do seu alvo. Um exemplo de uma tal construção é 14g2a-Zeta, que é uma fusão de um scFv derivado de hibridoma 14g2a (que reconhece disialoganglioside GD2). Quando as células T expressam esta molécula (normalmente conseguida através de transdução de vector de oncoretroviral), que reconhecem e matam células alvo que expressam GD2 (por exemplo células de neuroblastoma). Para atingir as células B malignas, os investigadores têm redireccionado a especificidade de células T usando um imuno quimérico específico para a molécula de linhagem B, CD19.
Ectodomínio edit
Peptídeo de sinal edit
Um péptido de sinal dirige a proteína nascente para o retículo endoplasmático . Isto é essencial para que o receptor está a ser glicosilada e ancorada na membrana da célula . Qualquer seqüência peptídeo sinal eucariótica geralmente funciona bem. Geralmente , o péptido sinal nativo ligado ao componente mais amino - terminal é utilizado ( por exemplo, um scFv com a ca
deia leve de orientação - ligante - cadeia pesada , o sinal nativa da cadeia leve, é usado
Região reconhecimento do antígeno edit
O domínio de reconhecimento de antigénio é normalmente um scFv . No entanto, existem muitas alternativas . Um domínio de reconhecimento de antigénio do receptor de célula T nativo ( TCR ) alfa e beta de cadeias simples foram descritas , como tem ectodomínios simples ( por exemplo, CD4 ectodomínio de reconhecer as células infectadas com o HIV ) e os componentes de reconhecimento mais exóticas , tais como uma citocina ligada ( o que leva a reconhecimento de células que possuem o receptor de citocina ) . Na verdade quase tudo o que se liga a um determinado alvo com elevada afinidade pode ser utilizada como uma região de reconhecimento do antigénio .
Espaçador edit
A região espaçador liga o domínio de ligação do antigénio para o domínio transmembranar . Ele deve ser suficientemente flexível para permitir a ligação do antigénio de domínio para orientar em direcções diferentes para facilitar o reconhecimento do antigénio . A forma mais simples é a região de dobradiça de IgG1 . As alternativas incluem a região CH2CH3 de imunoglobulina e porções de CD3 . Para a maioria das construções de scFv baseada , a charneira de IgG1 suficiente . No entanto o melhor espaçador tem muitas vezes que ser determinado empiricamente .
Domínio transmembranar edit
O domínio da transmembrana é uma hélice alfa hidrofóbico que atravessa a membrana . Geralmente , o domínio transmembranar do componente proximal mais membrana do endodomínio é usado . Curiosamente , usando o domínio transmembranar CD3 zeta pode resultar na incorporação de TCR artificial ao TCR nativo um factor que é dependente da presença da transmembrana CD3 zeta nativa carregada resíduo de ácido aspártico . Diferentes domínios transmembranares resultar em estabilidade receptor diferente . Os resultados do domínio transmembranar CD28 em um brilhantemente expressa , receptor estável .
Endodomínio edit
Este é o " fim - business" do receptor . Após o reconhecimento do antigénio , os receptores de agrupamento e é transmitido um sinal para a célula . O componente endodomínio mais comumente utilizado é CD3- zeta , que contém 3 ITAMs . Este transmite um sinal de activação de células T após a antigénio está ligado . CD3- zeta pode não fornecer um sinal de ativação plenamente competente e sinalização co -estimulação adicional é necessária . Por exemplo , CD28 e OX40 quimérico pode ser utilizado com CD3 Zeta para transmitir um sinal proliferativo / sobrevivência , ou todos os três podem ser utilizados em conjunto.